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高内涵筛选检测细胞增殖周期方法

实验示例

筛选分子:针对人类重要疾病的siRNA文库;
细胞模型:人宫颈癌细胞Hela;
检测仪器:高内涵筛选系统;
检测指标:细胞增殖、细胞周期。

实验流程

细胞培养;细胞转染;细胞染色;荧光扫描。

实验结果

1) 从全孔图分析siRNA加入后对细胞总数的影响

将扫获得的数据根据细胞大小(Wide, Depth)及荧光强度(Total intensity)进行分群,可获得不同细胞的分布图及数据。从下图可以看出,与NC相比,针对gene2的siRNA加入后显著降低了细胞总数,显示针对gene2的siRNA抑制Hela细胞的增殖。

2) 从数据的统计分析看siRNA加入后对细胞总数的影响

将细胞分析后获得的数据进行统计分析,结果显示,与对照NC相比,针对gene1、8、9、10的siRNA显著促进了细胞增殖,而针对gene2、3、4、5、6、7的siRNA显著抑制了细胞增殖,针对gene11的siRNA对细胞增殖无显著影响。

3) 从数据的统计分析看siRNA加入后对细胞周期的影响

将细胞分析后获得的数据进行统计分析,结果显示,与对照NC相比,针对gene1、8、9、10、11的siRNA显著增加了处于G1期细胞数,而针对gene2、3、4、5、6、7的siRNA显著增加了处于G2/M期细胞。从gene1及gene2不同荧光强度的细胞分布频度图也可看出gene1 siRNA处理的细胞处于G1期的细胞明显多于gene2;而G2/M期细胞明显少于gene2 siRNA。

4) 细胞的3D图片

实验过程中还可以提供细胞的3D图片,该图片在细胞信号转导研究过程中便于研究细胞的定位情况。

5) siRNA处理后的细胞Heatmap

Heatmap便于迅速寻找差异明显的药物分子,如下图分别显示了总细胞数及G1期细胞数的热图。

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